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大鼠脑电图的测量方法

时间:2015-08-31来源:本站作者:玉研仪器

  1.2.1 大鼠头皮导联描记 大鼠以水合氯醛腹腔麻醉(剂量为350mg/kg),俯卧位固定,取两眼外眦与外耳门连线的前中1/3交点处作一连线,并于此连线中点旁开1mm处(相当于冠状缝后矢状缝旁开1mm)。用自制的尖端有倒钩(防止脱落)的银电极刺入皮下,为作用电极;参比电极插在同侧颈部皮下。描记脑电图, 记录脑电图形态,并计算脑电图各波的相对功率值(相对功率值=各波的绝对功率值/总功率值×100%)。

  1.2.2 1.2.2  大鼠皮层导联描记 麻醉同上。常规暴露大脑皮层。将电极置于大脑皮层;参比电极插在同侧颈部皮下。描记脑电图,记录脑电图形态,并计算脑电图各波的相对功率值。处理系统为BM1118数字脑电地形图,描记条件为时值0.3,增益0.5cm=50μV。

  1.2.3 1.3 脑电监测记录方法 清醒状态下将大鼠固定,采用头皮针电极,双极导联法(额-顶)连接。电极分别取两眼连线中点(额叶)及两耳连线中点(顶叶)插入固定,鼻根部接地线。电极导线经舱壁接线柱引出舱外。用脑电趋势监测仪从加压前10min开始,到减压出舱后10min结束,以连续功率谱方式监测大鼠的脑电活动(带通3~30HZ),并用计算机录入全过程的大鼠脑电图。

  1.2.4 1.3 大鼠脑电记录:大鼠麻醉后,在颅骨正中十字缝左旁开4mm的中央区处钻孔,除尖端处外均绝缘的金属电极直至硬脑膜。另外在正中线上的额前端(前卤前1.5cm)同样埋入电极,作为地线电极,均用牙科凝固剂固定,作单个双导EEG记录。

  1.2.5 1.3  EEG描记在大鼠双侧大脑皮层、海马放置针电极,直径0.5mm。额叶皮层电极:前囟前2mm,中线旁2mm,硬膜下0.5mm。海马CA3区电极:前囟后3.8mm,中线旁2mm,硬膜下2.6mm。全部电极用牙托粉加502胶水固定。电极连接:1左皮层—左海马;2右皮层—右海马;3左皮层—右皮层;4左海马—右海马。参考电极置鼻尖。定标:2mm=50mV。纸速:30mm/s。

  1.2.6 (1)大鼠头骨包埋电极:大鼠在氯氨酮麻醉状态下,暴露头骨,在头骨矢状缝左侧,分别距前囟旁2mm、前2mm和旁2mm、后4mm处,颅骨钻孔,使其能插入银丝记录和参照电极,用502胶与牙托粉固定,术后动物食用水中加羟氨苄青霉素常规预防感染2d。

  1.2.7 大鼠动态皮层脑电图检测 在骨窗前后缘相当于损伤灶前后部位各安装二个螺丝电极(健侧电极位置参考骨窗侧),保障螺丝钉必须与脑皮层牢固和密切接触,参考电极置于双侧耳后。分别于致伤前、致伤后(用药前)和用药后描记双侧额顶皮层EEG。局部注射后连续观察30min,以后每间隔min记录1min。

  1.2.10 1h后用水合氯醛(340mg•kg-1,ip)麻醉进行气管插管,将大鼠固定在立体定位仪上。切开头部皮肤,分离皮下组织,暴露颅骨,在前囟前、后分别2mm和7mm右侧旁开2mm处埋藏皮层电极(不伤及硬脑膜)。用2根事先焊上导线的直径约1 7mm的钟表螺丝旋入两孔中,深度约1 5mm。将螺丝的接线与多导仪的正负极输入相联,立体定位仪的耳杆接地作为参照电极。待大鼠皮层脑电稳定后,ip氯化琥珀酰胆碱1 2mg•kg-1以维持动物的肌松状态。用灯照射大鼠背部使大鼠的肛温维持在35℃左右。将气管插管接在呼吸机的输出端,呼吸机频率为每分钟35~40次,潮气量2 5~3 5ml。关闭呼吸机2mg•kg,记录从关闭开始到皮层脑电平均振幅达到最低的时间。2mg•kg后恢复供气,脑电逐渐恢复正常。10mg•kg后关闭呼吸机3mg•kg,记录从关闭开始到皮层脑电完全恢复的时间。

  1.2.11 实验。将清醒兔俯卧位固定在兔台上。在左、右脑的额、颞、顶、枕各区头皮放置钩形针状电极,在左、右耳部放置无关电极和参考电极。待兔安静后,用CFM—8 数字化EEG机(上海海神研究所生产)记录用药前后的EEG原始数据。EEG的处理是根据其频率分为δ、θ、α1、α2、β1、β26个频段,通过功率绝对值计算其功率百分比。频段划分:δ(0 8~3 8Hz),θ(4 0~7 8Hz),α1(8 0~12 8Hz),α2(11 0~12 8Hz),β1(13 0~17 8Hz),β2(18 0~30 0Hz)。 3组兔分别静脉注射异丙酚(英国ZENECA公司产品,批号032000)2 5、5、10mg/kg,药物均在30s内匀速注完。记录给药前和开始给药后20、30、40、50、60、70、80、90、100、110s,2、5、10、15、20、30min的QPEEG。每时间点采样时间为5s。另取兔18只,随机分为3组,每组6只,分别在30s内静脉注射上述剂量的异丙酚,观察兔翻正反射消失的潜伏期和持续期(潜伏期指从刚开始给药到翻正反射刚消失之间的时间,持续期指从翻正反射刚消失至刚恢复的时间)。数据用 x±s表示,应用SAS软件中配伍组方差分析后,用Dunnett法,对各时间点数据与用药前比较。此外,给药后各时间点数据还与异丙酚剂量进行直线相关分析(用SAS软件处理),求出其相关系数r,揭示其量效关系。

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